Môi trường tối thiểu cần thiết dạng bột (MEM)

MEM có thể được sử dụng để nuôi cấy nhiều loại tế bào động vật có vú dạng huyền phù và bám dính, bao gồm HeLa, BHK-21, 293, HEP-2, HT-1080, MCF-7, nguyên bào sợi và tế bào hình sao sơ ​​cấp ở chuột, v.v. Môi trường nuôi cấy tế bào MEM không chứa protein, lipid hoặc yếu tố tăng trưởng. Vì vậy, thường cần thêm 10% huyết thanh bò thai nhi (FBS) làm chất bổ sung dinh dưỡng. MEM chứa Earle's Balanced Salts cho máy ấp CO2 hoặc Hanks' Balanced Salts cho máy ấp không có CO2.
Đối với nhiều ứng dụng nuôi cấy tế bào, chúng tôi cung cấp môi trường MEM đã được sửa đổi với nhiều thành phần khác nhau, cũng như môi trường MEM với các thành phần có thể tùy chỉnh.

Thành phần của MEM dạng bột

Môi trường bột khô MEM này cần được bổ sung natri bicarbonate, điều chỉnh pH và lọc khi chuẩn bị. Phương pháp pha chế chi tiết như sau:

1. Thêm 950 mL nước cất vào bình trộn càng gần với thể tích cuối cùng càng tốt.
2. Thêm môi trường khô vào nước ở nhiệt độ phòng (15°C đến 30°C) và khuấy nhẹ. Không đun nóng nước.
3. Rửa sạch bên trong gói để loại bỏ hết bột còn sót lại.
4. Thêm 29.3 mL dung dịch NaHCO75 3 g/L vào môi trường.
5. Điều chỉnh pH xuống thấp hơn 0.2 đến 0.3 đơn vị so với pH làm việc cuối cùng mong muốn bằng cách từ từ thêm và khuấy NaOH 1 N hoặc HCl 1 N. Độ pH có thể tăng từ 0.1 đến 0.3 đơn vị sau khi lọc. Độ pH làm việc được khuyến nghị là 7.1-7.4.
6. Điều chỉnh thể tích cuối cùng bằng nước cất.
7. Xử lý ngay môi trường thông qua chức năng lọc màng của bộ lọc 0.2 μm vào một thùng chứa vô trùng bằng hệ thống áp suất dương.